应用荧光原位杂交和特异性寡核苷酸探针检测亚力山大藻属(Alexandrium)和塔玛亚力山大藻(A.tamarense)的探索

摘要

针对赤潮生物塔玛亚力山大藻(Alexandriumtamarense)的28SrRNA,5.8SrRNA以及18S-28SITSrDNA序列和亚力山大藻属(Alexandrium)28SrRNA序列设计了相应的3个塔玛亚力山大藻的特异性探针(Tama5s01,Tama28s01和Tamaits01)和亚力山大藻属的一个特异性探针(Alex28s01).这些探针的特异性通过全细胞荧光杂交进行鉴定,荧光显微镜的结果表明3个塔玛亚历山大藻的特异探针能够与目标藻细胞发生阳性反应;探针Tama28s01和Tama5s01比Tamaits01具有更好的杂交效果.流式细胞仪分析结果也能将探针结合细胞与阴性细胞区分开来.3种辅助探针中Tama5s02和Alex28s02能够确实地加强荧光的强度和杂交率.应用探针可以在多种藻种的混合水样中将目标细胞鉴别出来.这些探针可望应用于监测自然水体中赤潮生物亚力山大藻属和塔马亚力山大藻。