高通量筛选技术在脑得生有效成分组研究中的应用

摘要

目的:运用高通量筛选技术对脑得生有效成分组进行研究,根据筛选结果,分析脑得生的组方原理,为选择脑得生中具有高活性的有效成分组提供实验依据.方法:首先对脑得生复方按水、乙醇、石油醚三个不同极性的溶剂进行提取,再将后两种粗提物经高效液相定时分离提取,共收集样品170个.其次根据脑得生主要用于脑缺血疾病的治疗,建立相关的高通量筛选模型—类小神经胶质细胞模型,即采用IFN-γ刺激U937和MOLT4共孵育,建立IL-10生成促进剂和TNF-α生成抑制剂高通量筛选模型,并对脑得生经高效液相分离得到的170个组分进行活性评价.结果:U937和THP-1共同孵育,经IFN-γ刺激后IL-10和TNF-α生成水平较对照组相比增加显著,具有脑缺血过程中分泌炎性因子的小神经胶质细胞的功能,可用于筛选脑缺血拮抗剂.脑得生170个组分经筛选后,结果显示有部分组分具有较强的IL-10生成促进作用,而有部分组分显示较强的TNF-α生成抑制活性.结论:根据高通量筛选结果表明,脑得生的部分组分有明显的抗炎作用,作用机理与抑制TNF-α生成和促进IL-10分泌有一定的关系.这些成分可能是脑得生新组方的有效成分组,值得进一步结合整体动物实验进行研究.结果尚提示高通量筛选技术将为中药复方的现代化研究开辟一条新的思路,加快中药现代化研究步伐.