miRNA-17-92高表达L1210细胞及L1210细胞小鼠白血病动物模型对化疗药物耐药性及复方浙贝颗粒的调节作用研究

摘要

目的:观察复方浙贝颗粒含药血清对miRNA-17-92高表达L1210细胞耐药的影响及miRNA-17-92高表达L1210细胞小鼠的不同分组治疗对化疗药物的敏感性.rn 方法:细胞模型:首先构建miRNA-17-92高表达L1210细胞系,制作空白组,阿霉素组高、中、低剂量组,复方浙贝颗粒4g·d-1· kg-1加阿霉素组高、中、低剂量组大鼠含药血清,分别培养L1210细胞,miRNA-17-92高表达L1210细胞,L1210/CDDP 细胞,经AnnexinV-FITC/PI双染后,通过流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率.动物模型:常规培养小鼠高表达miR 17-92的L1210系,给DBA／2N小鼠以尾静脉注射细胞浓度100×104,造模成功后用拉丁表法将造模小鼠随机分组:17-92观察组、17-92化疗组、17-92中药+化疗组、L1210化疗组、正常对照组.化疗组药物:环磷酰胺2天给药1次,连续用药3次;中药组药物:复方浙贝颗粒每天给药1次,连续用药14天.在实验过程中每7天检查1次外周血象;于给药第15天或濒死前处死动物,取材进行外周血白血病细胞计数、骨髓白血病细胞计数、Pgp、脾脏重量等指标检查.rn 结果:阿霉素诱导miRNA-17-92高表达 L1210低剂量组细胞总凋亡率(8.88±1.61)较L1210 低剂量组细胞总凋亡率(21.16±1.90)明显降低(P＜0.01),较L1210/CDDP 低剂量组总凋亡率(21.75±0.74)降低(P＜0.05).阿霉素诱导miRNA-17-92高表达L1210低剂量组细胞早期凋亡率(4.01±0.46)较L1210低剂量组细胞早期凋亡率(13.94±0.54)明显降低(P＜0.01),较L1210/CDDP低剂量组早期凋亡率(9.89±0.14)降低(P＜0.05).复方浙贝颗粒联合阿霉素诱导miRNA-17-92 高表达 L1210低剂量组细胞早期凋亡率(13.7±0.48)较阿霉素诱导miRNA-17-92 高表达 L1210 低剂量组细胞早期凋亡率(4.01±0.46)明显升高(P＜0.01);复方浙贝颗粒联合阿霉素诱导L1210 低剂量组细胞早期凋亡率(18±0.78)较阿霉素诱导L1210 低剂量组细胞早期凋亡率(13.94±0.54)升高(P＜0.05),复方浙贝颗粒联合阿霉素诱导L1210/CDDP 低剂量组细胞早期凋亡率(5.51±0.78)较阿霉素诱导L1210/CDDP 低剂量组细胞早期凋亡率(9.89±0.14)无明显变化.动物模型中各组小鼠均于用药第15 天或濒死前处死动物尾静脉取血、留取骨髓液,外周血白细胞数目分别为( 7.09±2.94)×109/L 、(15.30±11.40)×109/L 、(15.31±11.42)×109/L 、(11.47±4.25)×109/L 、(11.40±2.58)×109/L,外周血红蛋白分别为130.33±20.32 、159±13.10 、145.67±17.077 、156.177±13.937 、171.677±13.507,外周血小板数目分别为( 664.17±284.11)×109/L 、(1884.17±335.35)×109/L 、( 1673.17±428.42)×109/L 、(1279.67±650.68)×109/L 、(973.67±42.70)×109/L,外周血白血病细胞比例分别为(37.17±13.06)％、(5.67±3.93)％、( 1.33±0.82)％、( 0.83±0.75)％ 、0％,骨髓白血病细胞比例分别为( 26.92±10.98)％ 、(6.83±1.97)％、(3.17±1.03)％、(1.67±1.21)％、0％,脾脏重量(g)分别为0.70±0.18、0.20±0.17、0.44±0.47、0.23±0.19、0.60±0.18,Pgp(ng/ml)分别为32.68±10.88、26.66±10.87、32.00±11.25、20.31±11.12、17.40±2.64.rn 结论:复方浙贝颗粒含药血清对于miRNA-17-92高表达L1210细胞系有一定的逆转耐药、促进凋亡的作用.复方浙贝颗粒联合化疗,可以明显改善miRNA-17-92高表达L1210小鼠的化疗缓解率,但对下调Pgp不明显.