从医学生物作用角度印证冰片“通窍引经”的传统功效并探索其信号通路

摘要

目的：观察冰片是否具有促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血模型大鼠血脑屏障的作用,及其是否与激活β2肾上腺素受体-eNOS-NO途径有关,从医学生物学作用角度阐释冰片"通窍引经"的传统功效及其机制.rn 方法：采用大鼠大脑中动脉阻塞局灶性脑缺血模型,5d后神经功能障碍评分达5分者为造模成功.将模型成功大鼠随机分为7组,用药前经统计学检验各组间无显著性差异后,灌服给予相应药物(梓醇45mg·Kg-1、葛根素200mg·Kg-1、冰片200mg·Kg-1、BTXl.5 mg·Kg-1):模型组(M组,溶剂)、梓葛组(ZG组)、梓葛冰组(ZGB组)、梓冰组(ZB组)、葛冰组(GB组)、β2受体阻断剂+梓葛组(BTX+ZG组)、β2受体阻断剂+梓葛冰组(BTX+ZGB组),另设假手术组(S组,溶剂),每组10只.各组给药l0min后取材,采用HPLC-MS测定脑脊液中梓醇和葛根素含量,Western blot测定脑组织中eNOS含量、β2受体表达,Griess检测脑组织中NO含量.rn 结果：与假手术组相比,造模大鼠神经功能得分均值均在5分以上,具有显著差异(P＜0.05),显示造模成功.除假手术组外,经单因素方差分析,给药前各组之间的神经功能评分均无显著性差异(P＞0.05).给药后与模型组相比,ZG组梓醇含量为26.67ng·mL-1,葛根素含量低至无法检出,脑组织中eNOS表达和NO含量、β2受体表达没有显著差异(P＞0.05):与ZG组相比,ZGB组、ZB组、GB组脑脊液中梓醇含量增加至40-43ng·mL-1、葛根素含量增加至72-75 ng·mL-1,脑组织中eNOS表达和NO含量、β2受体表达均有显著升高(P＜0.05),显示冰片有促进作用;与ZG组相比,BTX+ZG组大鼠脑脊液中梓醇含量为21 ng·mL-1,葛根素检测不出,两组无显著差异,显示BTX无抑制作用;与ZGB组相比,BTX+ZGB组脑脊液中梓醇含量32ng·mL-1、葛根素含量47ng·mL-1,脑组织中eNOS表达和NO含量均有显著下降(P＜0.05),显示BTX有抑制作用.rn 结论：冰片能够显著促进梓醇、葛根素透过局灶性脑缺血大鼠血脑屏障,其作用可被β2肾上腺素受体阻断剂布他沙明所阻断,其机制可能与上调β2肾上腺素受体从而促进eNOS表达,进而使NO含量升高有关.