应用PCR技术扩增细菌16S rRNA快速诊断肝硬化自发性细菌性腹膜炎的实验研究

摘要

目的：建立PCR技术扩增细菌16S rRNA的快速诊断肝硬化自发性腹膜炎的实验方法并探讨其临床应用价值.rn 方法：以细菌16S rRNA基因为靶序列,利用计算机软件Primer Express设计一对通用引物UP1和UP2,建立快速诊断肝硬化自发性腹膜炎的PCR实验方法;同时采用该方法检测60例肝硬化患者的腹水中的细菌DNA情况,并比较PCR方法与腹水培养法的灵敏度和特异度等.rn 结果：用引物UP1、UP2对12个不同菌株进行PCR扩增,均得到996bp左右长度的DNA片段,敏感性实验表明,用UP1、UP2引物进行的PCR扩增最低可检测出10pgml.对60例肝硬化腹水标本进行PCR扩增,阳性率为30.0％(18/60),明显高于同期腹水细菌培养阳性率仅为6.7％(4/60),二者比较有显著性差异(X2=8.625,P＜0.05).rn 结论：PCR法优于腹水培养,其阳性率、灵敏度、特异度均较高,具有早期、快速诊断自发性细菌性腹膜炎的重要的临床应用价值.