二硫化碳暴露对孕鼠子宫组织氧化应激水平及DNA甲基化的影响

摘要

目的：构建胚胎植入期不同时点暴露于二硫化碳(CS2)致胚胎植入障碍动物模型,观察CS2暴露后孕鼠子宫组织氧化应激及DNA甲基化水平,探讨CS2致胚胎植入毒性作用机制.rn 方法：健康雌性昆明小鼠分别在孕3天(GD3)、GD4、GD5、GD6接受1次腹腔注射(CS2剂量为631.4mg/kg,染毒前配置;对照组为橄榄油),单次暴露后在相应终点结束实验.GD9观察CS2对孕鼠胚胎植入的影响.运用考马斯亮蓝法对暴露组和对照组孕鼠子宫组织匀浆液进行蛋白定量,分光光度法测定孕鼠子宫组织氧化应激水平,十二烷磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术和蛋白免疫印迹法测定孕鼠子宫组织甲基转移酶1(DNMT1)含量.rn 结果：围植入期不同时点暴露CS2均可导致GD9胚胎植入数目减少,GD3、GD4、GD5、GD6暴露组胚胎植入率分别为56.95％、36.26％、39.55％和52.74％,与对照组比较差异均具有统计学意义(P＜0.05);暴露后24h内孕鼠子宫组织氧化应激水平的变化具有统计学意义,在18h时孕鼠子宫组织氧化应激水平达到最高,与对照组比较变化具有统计学意义(P＜0.01);孕鼠在GD4暴露于CS2,暴露后6h孕鼠子宫组织DNMT1表达水平明显降低,而在暴露后12h时孕鼠子宫组织DNMT1表达水平明显升高,与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01),并且CS2暴露后12h孕鼠子宫组织DNMT1表达水平与胚胎植入数目之间呈负相关(r=-0.433,P＜0.01).rn 结论：围植入期不同时间暴露于CS2均可导致孕鼠子宫组织发生明显的氧化应激反应,并且导致子宫组织甲基化水平变化.二者协同作用可能是CS2暴露致胚胎植入障碍的重要机制之一.