抗禽流感H9N2亚型血凝素特异性单克隆抗体的制备与分析

摘要

本研究采用低致病力禽流感病毒(LPAIV)H9N2亚型A/Chicken/Shanghai/10/99(SH/10/99)和A/CK/Guangxi/10/99(GX/10/99)毒株作为免疫原,免疫8周龄BALB/C小鼠,用血凝抑制试验(HI)方法筛选和有限稀释法克隆纯化,最后获得十株H9亚型HA特异性单抗细胞株:其中SH/10/99作为免疫原的有四株:A3、B/D12、A11/C6、A/B3;GX/10/99作为免疫原的有六株:C/D4、D/G7、C/C10、B/E9、C/E2、E/B11.10株具有HI活性的H9亚型特异性McAbs与其他H9亚型AIV分离株的交叉反应实验表明,A/B3、B/D12、C/D4、D/G7这四株单抗对所选择的毒株具有较好的HI活性,A/CK/Heilongjiang/35/00病毒不与任何一株单抗发生血凝抑制反应.A/B3、B/D12、C/D4进行病毒的中和实验结果表明,抗体的中和活性与其血凝抑制活性之间存在很大的相关性,且基本上是一致的,且能对鸡胚提供很好的保护.所以这些单克隆抗体将在禽流感的预警预报工作以及H9亚型流感病毒HA基因的结构和功能的研究中发挥重要的作用。