马立克氏病病毒CVI988株病毒囊膜糖蛋白B基因启动子的克隆、及活性分析

摘要

为了选择适宜的启动子调控外源基因的表达,以改善马立克氏病毒为载体的重组病毒的免疫保护力,克隆了马立克氏病病毒(MDV)CVI988株病毒囊膜糖蛋白B基因启动子(gB启动子),通过测序分析发现克隆的gB启动子与Genbank上发表的MDVGA株序列的同源性为99.5﹪.分别以lacZ、Luc为报告基因,构建pSK-gB-LacZ和pgB-Luc真核表达载体.将pSK-gB-LacZ转染CHO,转染细胞经固定、染色后,出现兰色,说明在CHO中,所克隆的gB启动子可以有效地调控lacZ基因的转录.在CEF细胞中,利用虫荧光素酶系统将gB启动子与SV40及hCMV启动子进行活性比较比较,结果发现hCMV启动子的活性为gB启动子的31倍,SV40启动子为gB启动子的27倍.本研究为下一步gB启动子的应用奠定了基础.