黄瓜花叶病毒分离物核酸酶保护试验(RPA) 方法的株系分化研究

摘要

采用黄瓜花叶病毒(CMV)亚组Ⅰ株系Fny-CMV及亚组Ⅱ株系Ls-CMV的RNA2的特定序列片段的cDNA克隆,体外转录,同时掺入32P标记制备负链RNA探针,再与纯化的甜椒上的CMV中国分离物的RNA进行杂交,检测其与探针之间的同源性.共检测样品分离物3份.试验结果表明:河南新乡和北京密云的CMV甜椒分离物与Fny-CMV的核苷酸有高度同源性,隶属于Fny-CMV为代表的亚组Ⅰ株系.来自福建的样品与亚组Ⅱ的Ls-CMV株系有高度同源性,隶属于CMV亚组Ⅱ株系.本试验同时利用源于我国CMV亚组Ⅰ的K株系的RNA2两个EcoRⅠ位点间1657～2125nt的核苷酸序列为探针,同样与以上3份CMV中国分离物进行RNA杂交,进一步比较分析了这几个分离物与我国亚组Ⅰ的K-CMV株系的关系,证明了我国CMV存在亚组与株系分化。