miR-9对缺氧诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞表型转化的影响及调控机制研究

摘要

探讨miR-9在缺氧诱导肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)表型转化过程中的作用及调控机制.采用RT-qPCR检测候选miRNAs的表达情况,比较缺氧(3％O2)组与常氧对照组各miRNAs表达差异并筛选出表达上调倍数最高的miR-9;转染miR-9 mimics与inhibitor,采用Western Blot检测血管平滑肌细胞收缩表型标志基因的表达,EdU染色检测细胞增殖活性;RT-qPCR法检测缺氧及转染HIF-1α特异性siRNA后miR-9及各初级转录本的表达变化;ChIP验证缺氧后HIF-1α在各预测调控区域的结合情况;研究结果显示，miR-9参与了缺氧诱导的PASMCs表型转化进程;缺氧条件下miR-9表达升高可能主要源于miR-9-1与miR-9-3表达上调;缺氧诱导的miR-9表达上调受HIF-1调控。