利用苏云金芽胞杆菌细胞表面展示系统表达禽流感病毒NP蛋白

摘要

利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白CTC表面展示系统研究在细胞表面展示禽流感病毒NP蛋白的可行性和最佳方案,为研制既安全有效又能常温长期保藏和运输的禽类口服基因工程疫苗奠定基础.用全长np基因或部分np基因(npp)代替S-层蛋白ctc基因的中部或C-端,构建了4个融合基因;利用电脉冲转化法将含融合基因的重组质粒转入苏云金芽胞杆菌受体菌BMB171菌株中,获得了5个重组菌株:BN(含ctc-np)、BCN(含ctc-np和csaAB操纵子质粒)、C-S(含csa-ctc-np)、BCCN(含ctc-npp和csaAB操纵子质粒)和CN(含csa-ctc-npp).通过玻片凝集试验和小鼠免疫学实验证实,5个重组菌株均成功地在细胞表面展示了NP蛋白并具有免疫学活性,其中,重组菌株CN表现出了最高免疫学活性,其含融合基因csa-ctc-npp,证明这种融合基因的构建方式是最佳方式,这为利用苏云金芽胞杆菌S-层蛋白CTC表面展示系统构建包含其它病原体抗原基因的重组菌株并制备成禽用口服疫苗奠定了基础.