带有氯霉素抗性基因标记的重组布氏杆菌S2的构建及其生物学特性

摘要

无法区分免疫接种和自然感染是限制布氏杆菌疫苗应用的主要原因.本研究通过基因同源重组技术,用氯霉素抗性基因(Cnf)替代布氏杆菌弱毒S2株的WbkC基因,筛选获得重组布氏杆菌rS2-WbkC株.试验发现,重组菌rS2-WbkC由原先的光滑型转变成粗糙型.rS2-WbkC在TSA培养基上传50代后仍能稳定表达氯霉素抗性蛋白.小鼠动物试验模型表明,rS2-WbkC与S2有相似的保护性,但rS2比S2具有更高的安全性.rS2-WbkC免疫小鼠后,其抗血清可通过平板凝集试验与S2免疫的血清相区分.本研究为布氏杆菌标记疫苗的研制提供了技术平台.