家禽流行性感冒病毒核蛋白之核酸序列分析与酵素连结免疫吸附分析(ELISA)套组之开发

摘要

本研究以A/Chicken/Taiwan/NCHU-0507/99(H6N1)毒株其NP基因开读框利用E.coli表现系统,表现之重组核蛋白(rNP)所得之纯化rNP使用于Western blot可检测出15种H血清亚型之抗体,而将其使用于酵素连结免疫吸附法(ELISA),也可检测出15种H血清亚型之抗体.进一步检测469只田间鸡只血清及165只实验感染及非感染鸡只血清,以血球凝集抑制试验(HI)确认纯化rNP使用于ELISA检测结果之特异性.相对于胶体免疫扩散试验(AGID),纯化rNP使用于ELISA之敏感性为100％及特异性为80.4％.而纯化rNP使用于ELISA相对于HI之检测结果一致性为94.8％.这些结果显示纯化rNP使用于ELISA与AGID具有高度之相关性且比AGID更具敏感性.相对于商品化ELISA套组,纯化rNP使用于ELISA之敏感性为99.6％及特异性为90.4％.结果显示纯化rNP使用于ELISA与商品化ELISA套组一样具有良好之表现性.所以使用纯化rNP并使用于ELISA可发展建立为高敏感性及特异性且达到快速检测大量鸡只家禽流行性感冒抗体样品的血清学诊断技术.