PI3Kδ抑制剂CAL-101对骨髓瘤细胞系U266和RPMI8226的作用及与其他新型药物的协同效果初探

摘要

目的：探讨PI3Kδ抑制剂CAL-101对多发性骨髓瘤IgE型细胞系U266、IgG型细胞系RPMI8226和骨髓瘤患者原代细胞的作用和机制,为这类疾病的治疗提供新的思路.rn 方法：用不同浓度的CAL-101处理多发性骨髓瘤细胞系U266、RPMI8226,以MTT法检测CAL-101对两种细胞系的增殖抑制作用;Western Blot法分析细胞系和患者原代细胞中磷酸化蛋白AKT、ERK(p-AKT、p-ERK)、非磷酸化蛋白AKT、ERK和PI3Kδ表达水平,观察其在被CAL-101处理后的变化;MTT法结合CalcuSyn software软件分析检测CAL-101是否可与PCI-32765、SAHA、硼替唑咪(Bortezomib,BTZ)产生协同抑制骨髓瘤细胞增殖的效应.rn 结果：10 a mol/L及更高浓度的CAL-101对U266细胞系、RPMI8226细胞系有明显的增殖抑制作用，呈剂量依赖性，15、20、20、30、40 a mol/L(AL-101作用于U266细胞48小时，细胞增殖抑制率分别为(29.65±1.23)%,(33.54±1.51)%,(41.72±1.78)%,(53.67±2.01%),(79.25±1.92)%空白对照组为(1.37±0.02)%(P<0.05)。作用于RPM工8226细胞系48小时，细胞增殖抑制率分别为(20.66±2.18)% ,(41.08±1.92)%,(18.90±2.75)%,(58.47±1.18)%,(59.58±2.27)%,(64.01±1.97)，空白对照组为(2.35±0.58)%(P<0.05).Western Blots分析显示，在U266细胞系、RPM工8226细胞系和骨髓瘤患者原代细胞中，均可见p-AKT、p-ERK、AKT、ERK和PI3K6的表达;经CAL-101处理后，p-AKT和p-ERK的表达水平显著下调。CalcuSyn software软件分析证实，在U266细胞系中，CAL-101与PCI-32765, SAHA,BTZ具有协同作用，而在RPM工8226细胞系中，CAL-101与PCI-32765、硼替吟咪具有协同作用，药物联用可显著协同抑制骨髓瘤细胞的增殖，CI值小于1。rn 结论:PI3Ks抑制剂CAL-101细胞系U266和RPM工8226的增殖。在细胞系和原代细胞中，均可见p-AKT、p-ERK、s的表达。而CAL-101抑制增殖的机制可能与下调AKT信号通路中p-AKT水平和AKT可抑制骨髓瘤、ERK和PI3KERK通路中p-ERK有关。CAL-101与骨髓瘤一线治疗药物硼替佐米和新药PCI-2765, SAHA有显著地协同抗骨髓瘤效应。CAL-101有望为多发性骨髓瘤的治疗带来希望。