miR-106a抑制胶质瘤细胞增殖并诱导凋亡

摘要

目的：胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,具有较高的病死率.现有的研究表明miR-106a在多种肿瘤中表达上调,并发挥着致癌性作用,但miR-106a在胶质瘤中的表达和作用却并不清楚.rn 方法：通过实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)测定不同级别胶质瘤组织和胶质瘤细胞系内的miR-106a水平.转染miRNA寡聚核葺酸后，通过MTT比色法和流式细胞仪检测miR-106a对胶质瘤细胞系U87和U251的增殖能力、细胞周期和凋亡影响。并通过Westen Blot和荧光素酶实验验证miR-106a对E2F1的调控关系。miR-106a对E2F1的调控关系。rn 结果：qRT-PCR分别检测了不同级别胶质瘤(WHOⅡ级4例、Ⅲ级4例和Ⅳ级4例)中miR-106a的表达情况，结果表明miR-106a在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系内表达水平相对正常脑组织显著下降，并且miR-106a表达水平与胶质瘤病理级别负相关。胶质瘤细胞转染miR-106a后，通过MTT比色法连续监测4d，结果显示miR-106a模拟体组较对照组细胞增殖抑制率显著升高，其中最大细胞增殖抑制率出现在miR-106a模拟体转染后48h。同时通过流式细胞仪发现，细胞系过表达miR-106a可显著抑制胶质瘤细胞的增殖能力，阻滞细胞周期于G0/G1期，同时诱导胶质瘤细胞凋亡增加。更为重要的是在胶质瘤细胞中过表达miR-106a可显著抑制E2F1蛋白。进一步通过荧光素酶实验表明miR-106a可特异性的结合E2F1的3'UTR区，而对突变型的E2F1的3'UTR没有作用，这表明miR-106a是通过特异性的抑制E2F1蛋白而发挥抑制胶质瘤增殖和促进凋亡作用的。rn 结论：本研究的数据表明miR-106a在胶质瘤组织和胶质瘤细胞系内显著下调，并与胶质瘤级别负相关。并且上调miR-106a可明显对胶质瘤细胞产生阻滞细胞周期、抑制增殖和诱导凋亡的作用。而miR-106a的作用是通过抑制E2F1而发挥的。本研究对认识胶质瘤的发生提供了新的理论基础，并为胶质瘤的治疗提供了思路。