人子宫内膜腺癌微血管内皮细胞培养鉴定及放射敏感相关基因筛选

摘要

目的：建立人子宫内膜腺癌微血管内皮细胞(Human endometrial adenocarcinoma-derived microvascularendothelial cells,HEA-MECs)的体外原代分离培养方法,并通过检测HEA-MECs放射前后的基因表达差异,初步筛选出与放射敏感性相关的微血管内皮细胞基因,为放射增敏及抗血管生成治疗提供实验基础.rn 方法：取术中新鲜的子宫内膜腺癌标本，采取抗CD31免疫磁珠结合的方法提取MECs，对分离的MECs原代培养并通过免疫荧光技术和体外管腔形成实验对其进行鉴定。把原代培养的MECs分为实验组(放射组)与对照组(非放射组)，分别进行RNA提取纯化后应用人类全基因组寡核葺酸芯片检测MECs基因表达差异。rn 结果：提取的原代HEA-MECs通过免疫荧光技术证实表达MECs特异性标志物vWF，体外管腔形成实验可见自发二维管腔形成。通过基因表达谱共筛选出有意义差异表达基因68条，其中共同上调/下调的基因40条，上调22条，下调为18条，涉及细胞凋亡、DNA损伤与修复、细胞周期调节、趋化因子、细胞信号传导、细胞粘附、细胞应激、细胞生长调节和血管生成等多种细胞调节机制。rn 结论：本研究建立了HEA-MECs的原代培养方法，并初步筛选出与放射敏感相关的MECs差异基因，为子宫内膜癌放射增敏与抗血管生成治疗提供了实验基础。