YS-1联合用药抗肿瘤作用研究

摘要

目的：筛选与重组人p43蛋白(YS-1)联合具有协同作用的药物,并研究其抗肿瘤协同作用的机制.rn 方法：1)用MTT法筛选与重组人p43蛋((YS-1)联合使用对肿瘤细胞株具有协同作用的药物;2)采用细胞克隆形成实验、细胞划痕修复实验以及细胞迁移实验,检测体外YS-1与阿霉素联合用药对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响;3)采用流式细胞术以及caspase3/7检测试剂盒,考察联合用药对细胞凋亡的影响,同时采用western-blot及RT-PCR检测联合用药时相关蛋白的表达情况,以期找到影响联合用药作用的信号通路;4)使用裸小鼠皮下异位移植瘤实验进行验证,检测YS-1与其联合使用对体内移植瘤是否也具有协同抑制作用.rn 结果：1)YS-1 250 a g/ml单独使用，对多数肿瘤细胞无明显细胞毒性，但YS-1与细胞毒类药物联合使用，可以降低多数药物的IC50值。2)YS注与阿霉素联合使用，可以降低人肾癌786-0细胞克隆形成、划痕修复及迁移能力。3)YS-1与阿霉素单独使用及联合用药对caspase3/7以及caspase9的表达无明显影响，对细胞的凋亡促进作用也不明显;Western-blot及RT-PCR结果显示，阿霉素单独使用可以上调Raf/MEK/ERK通路中各级蛋白的磷酸化水平，而YS-1则可以下调Raf/MEK/ERK通路中各级蛋白的磷酸化水平，并联合给药组下调更明显。4)裸小鼠体内移植瘤实验结果显示，YS-1与阿霉素联合使用，对人肾癌786-0细胞具有协同抑制作用。rn 结论：YS-1与阿霉素联合使用，对人肾癌786-0细胞具有协同抑瘤作用，其作用机制可能通过YS-1抑制Raf/MEK/ERK通路中各级蛋白的磷酸化而实现。