本文研究目的:通过研究血小板释放生长因子移植在心肌梗死后组织修复中的作用,初步探讨血小板旁分泌功能对心肌梗死后心室重塑的影响. 研究方法:经腹主动脉抽取健康成年Wistar大鼠的血液,采用二次离心法制作富血小板血浆(Platelet Rich Plasma,PRP)和贫血小板血浆(Platelet Poor Plasma,PPP),凝血酶激活后提取上清液,低温冻存.选取6-8周Wistar大鼠,随机分为PRP组、对照组和假手术组;结扎Wistar大鼠冠脉前降支建立急性心肌梗死模型,结扎大鼠冠脉前降支后立即向缺血的周边区域注射100 μ L富血小板血浆上清液或贫血小板上清液.于术后第7天和28天处死动物,一部分大鼠用含有15％KC1的冰PBS灌流后立即行压力-容积曲线测定,另一部分大鼠用冰PBS灌流后低温冻存用以组织学分析.心肌组织横断面切片经过天狼猩红染色后,在偏振光显微镜下结合图像分析软件分析梗死壁厚度、梗死面积、膨展程度,在环形偏振光显微镜下结合图像分析软件分析胶原重构;采用免疫组化方法,于荧光显微镜下结合图像分析软件分析新生血管内皮细胞和平滑肌细胞以及心肌横断面积. 研究结果:相对于对照组,PRP组28天离体心脏舒张末压力-容积曲线左移,提示PRP组梗死后左室整体扩张程度减小.PRP组7天和28天梗死区游离壁厚度大于对照组(1.93±0.20 vs1.75±0.12 mm,P＜0.01;1.75±0.15 vs 1.59±0.25 mm).PRP组28天梗死面积小于对照组(40.34±4.62 vs 45.60±5.72 ％),差别无统计学意义.PRP组7天的膨展指数小于对照组(0.41±0.04 vs 0.54±0.06,P＜0.05);PRP组28天的膨展指数较对照组有减小的趋势,但无统计学差异(0.64±0.08 vs 0.73±0.09).7天和28天PRP组和对照组梗死区以及室间隔的胶原容积分数均呈上升的趋势,7天和28天PRP组梗死区胶原容积分数均较对照组明显增高(42.25±6.72 vs 31.93±7.69 ％,P＜0.01;76.86±5.47 vs 55.30±5.48％,P＜0.01);虽无统计学差异,但PRP组室间隔的胶原容积分数有比对照组减小的趋势(7.40±1.06 vs 7.31±1.59 ％,8.48±3.89 vs 8.02±1.42 ％).环形偏振光显微镜下绿、黄、橙、红色胶原反应了胶原由细至粗的过程,7天梗死区PRP组的绿色胶原含量比对照组明显增多(45.3±2.6 vs 34.6±2.5 ％,P＜0.01),28天梗死区PRP组的绿色胶原含量比对照组明显减少(13.7±1.8 vs 24.7±1.5 ％,P＜0.01),而28天梗死区PRP组的橙色胶原比对照组明显增多(66.9±1.0 vs 43.0±1.6 ％,P＜0.01).7天和28天PRP组非梗死区心肌细胞横断面积明显小于对照组(419.38±63.65 vs 448.52±79.45 μm2,P＜0.01;446.05±87.82 vs 490.63±83.44 μm2,P＜0.01).7天和28天PRP组梗死区(165.5±32.1vs 84.2±29.3/mm2,P＜0.05;116.9±2.4 vs 88.1 ±5.4/mm2,P＜0.01)和非梗死区(79.4±8.2 vs 44.1±6.4/mm2;P＜0.01;63.8±6.0 vs 47.4±4.5/mm2,P＜0.01)小动脉长度密度大于对照组.7天和28天PRP组梗死区(82.9±12.5 vs 43.9±11.5/mm2,P＜0.01;67.1±9.8 vs 33.4±9.1/mm2,P＜0.01)和非梗死区(64.8±12.4 vs 36.2±8.7/mm2,P＜0.01;54.4±10.0 vs 29.6±8.0/mm2,P＜0.01)毛细血管密度大于对照组. 研究结论:活化富血小板血浆上清液移植可改善心肌梗死后心室重塑,可能的机制为富血小板血浆激活后所释放的生长因子可促进心肌梗死后血管新生,从而加速心肌梗死后新生细胞外基质的成熟和保护缺血心肌细胞.
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