醋酸铜诱导Hela细胞的凋亡

摘要

目的：研究醋酸铜对人宫颈癌细胞(Hela细胞)存活,生长,周期和凋亡的影响及Bcl-2,Fas基因表达的变化,探讨铜离子引起细胞凋亡的分子机制.方法：体外培养Hela细胞,不同剂量醋酸铜(0～40 μg/ml)作用72 h,苔盼蓝拒染法测细胞存活率,噻唑蓝法(MTT)测醋酸铜对细胞生长的抑制作用.不同剂量的醋酸铜(0～60 μg/ml)作用36 h,碘丙啶(PI)单染测铜离子对细胞周期的影响;作用24、36和48 h,Annexin V/PI双染法测细胞凋亡;作用24 h,RT-PCR法检测与凋亡有关基因Bcl-2,Fas表达的变化.结果：苔盼蓝拒染法显示,随着浓度醋酸铜的增加,细胞存活率降低;MTT法显示,醋酸铜对细胞生长有强烈的抑制作用.PI单染证明铜离子对细胞周期无影响.Annexin V/PI双染法的结果显示,随着醋酸铜浓度及作用时间的增加,细胞凋亡率显著升高.基因表达分析显示Bcl-2表达量随铜离子增加而降低,而Fas与Bcl-2相反.结论：醋酸铜降低Hela细胞的存活率,抑制Hela细胞的生长,这主要是由细胞凋亡引起的.凋亡的发生可能与Bcl-2 mRNA水平的下降及Fas mRNA水平的升高有关.