质粒DNA的发酵条件及纯化工艺研究

摘要

在摇瓶实验的基础上,在7L发酵罐中实现了工程菌E. coli DH10B的高密度发酵,单位湿重的质粒产量可达到1mg/g发酵液.细胞经碱性裂解后,先后采用凝胶过滤和亲和层析纯化,质粒DNA的超螺旋含量达到90％以上.此生产工艺适应于其他质粒DNA的生产,整个生产流程不需使用动物源性的酶及有毒试剂,为质粒DNA的大规模生产打下了良好的基础.