液相色谱-质谱联用测定RNA中N6-甲基腺苷含量及其与糖尿病的相关性研究

摘要

由于FTO基因在维持能量平衡及稳态中的作用，本文推测FTO基因的表达升高会增加2型糖尿病的发病率，而FTO会使m6A去甲基化而降低其水平。基于以上分析，在本研究中建立了HPLC-MS/MS测定RNA中m6A含量的方法，考察了方法的精密度、准确性，并对180个血液RNA样本(88个糖尿病病人及92个正常人)中m6A的含量进行了分析，并结合实时定量PCR分析了FTO基因、ALKBH5基因的表达。结果表明糖尿病病人RNA中m6A的含量与正常人相比显著降低，m6A含量与FTO基因的表达及糖尿病的发生显著相关，而与ALKBHS基因没有类似的相关性;同时ROC分析表明RNA中m6A的含量可能可以作为糖尿病的标记物。