FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析

摘要

将口蹄疫病毒(FMDV)Asia/JQ株P1-2A、3C基因克隆到家蚕杆状病毒转移载体pVL1393中，构建重组家蚕杆状病毒转移质粒pVL-P12A3C。pVL-P12A3C与线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6 DNA共转染家蚕细胞，经空斑筛选后成功获得了携带有目的基因的重组病毒Bm(P12A3c)。通过免疫荧光技术及双抗体夹心ELISA法证明重组病毒能够正确表达插入的外源基因。将获得的重组病毒Bm-ORF感染家蚕5龄起幼虫，通过双抗体夹心ELISA法和电镜观察证明目的基因在蚕体中获得较高水平表达并组装成空衣壳。用蚕表达产物作抗原制备疫苗免疫牛，免疫动物均产生了特异性抗体。免疫后28天进行病毒攻击保护试验，获得了4/5的完全保护。