磷脂酶D在纤维素载体上的共价固定化研究

摘要

以纤维素为载体、环氧氯丙烷(Ech)为活化剂,共价固定化链霉菌发酵产磷脂酶D(PLD)。考察了载体活化及酶固定化的适宜条件；并研究了固定化酶的性能。结果表明,适宜的载体活化条件为:NaOH 1mol/L 20ml，纤维素1g，Ech 4ml,室温,中速搅拌；适宜的酶固定化条件为:环氧基纤维素1g,酶30 ml(粗酶蛋白质浓度约0.8g/L)、37℃、固定化反应时间12h。获得的最大酶固定化率为48.8%,其固定化磷脂酶的水解活力可达10.5IU/g。固定化磷脂酶D的最适pH为8.0、最适温度为50℃,与游离酶相比最适 pH 未改变,而最适温度提高10℃。固定化酶的热稳定性和操作稳定性均高于游离酶。