大肠杆菌O157溶源性Stx噬菌体的诱导及鉴定

摘要

采用PCR方法对62株大肠杆菌菌株进行stx基因检测，将筛选到含有stx基因的菌株进行噬菌体诱导、分离、纯化和鉴定，并对编码Stx2的噬菌体(Stx2噬菌体)相关基因进行序列测定。将分离的Stx2噬菌体溶源大肠杆菌MC1061实验菌株，获得的Stx2噬菌体溶源菌作为指示菌筛选诱导细菌滤液中的Stx2噬菌体以外的噬菌体。实验中筛选到8株大肠杆菌O157菌株经丝裂霉素c诱导后均优先释放Stx2噬菌体，不释放Stx1噬菌体。纯化的Stx2噬菌体能够溶源MC1061实验菌株，验证了stx基因在大肠杆菌菌株间的水平转移，同时还建立了指示细菌诱导滤液中多种噬菌体的优化方法。对其中一株Stx2噬菌体A亚单位进行测序验证，通过比对发现其与GenBank上登陆的X07865(Bacteriophage 933W)、AP005154、AF548457、AP000363(Bacteriophage Stx2-Sa)的同源性均高达99％。