长春新碱耐药结肠癌细胞株HCT-8/VCR的建立及其耐药机制的初步研究

摘要

目的：建立长春新碱耐药结肠癌细胞株,初步探讨该细胞系的多药耐药的机制。rn 方法：长春新碱耐药结肠癌细胞株的建立通过逐步增加药物浓度方法，细胞毒实验采用MTT法，细胞周期测定采用碘化丙啶(PI)荧光染色法，P-糖蛋白(P-gp)采用流式细胞术，细胞内长春新碱(VCR)浓度采用高效液相色谱法(HPLC)，多药耐药相关基因的表达采用RT-PCR方法。rn 结果：HCT-8/VCR的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株HCT8相似，HCT-8/VCR对长春新碱(VCR)为19.7;对其它四种化疗药物也表现出不同的抗性，HCT-8/VCR细胞还表现P-gp(MDR1)表达增加(P＜0.01)和累积VCR和DOX能力增强(P＜0.01)，但MRP1表达没有变化。rn 结论：建立一株可获得药物浓度(2 000 ng/ml)的VCR产生耐药的结肠癌细胞株HCT-8/VCR，其机制为P-gp过量表达导致的细胞外排活性增强有关。该细胞株可用于以P-gp为靶点的多药耐药逆转剂的研究。