超声微泡促进TDL复合物介导基因转染的体外实验

摘要

目的研究超声微泡促进TDL复合物介导的肝细胞生长因子(HGF)基因在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)中的转染效果。方法将HuVEC接种在24孔板中，随机分为以下5组：(1)空白对照组；(2)TDL复合物组；(3)TDL复合物+微泡组；(4)TDL复合物+超声组；(5)TDIL复合物+微泡+超声组。荧光显微镜及流式细胞仪检测plRES2-EGFP／HGF在细胞内的表达及转染效率。MTT法检测该方法对HUVEC生长活性的影响。RT—PCR及Western Blotting检测HGF的mRNA及蛋白的表达。结果TDL复合物+超声+微泡组的绿色荧光强度及转染率均高于其它各组，并对细胞活性无明显影响。TDL复合物+超声+微泡组的HGF mRNA及HGF蛋白的表达也均高于各组。结论 超声微泡可提高TDL复合物介导的基因在体外培养HUVEC的转染效率，并对细胞活性无明显影响，该方法为提高非病毒载体的转染效率提供一个新策略，可能成为缺血性心脏病基因治疗的有效手段之一。