树枝状聚合物修饰碳纳米管固定胰蛋白酶用于靶上酶解及MALDI质谱鉴定

摘要

基质辅助激光解析电离飞行时间质谱己经被广泛应用于蛋白质组学的研究中，成为蛋白质鉴定的有力工具之一。将氨基为末端三甲磺酸基为核的四代(G4.0)树枝状聚合物共价合成在碳纳米管表面，再将胰蛋白酶固定于树枝状聚合物末端，得到高水溶性的固定化酶。用合成的固定酶进行标准蛋白细胞色素c,马心肌血红蛋白和溶菌酶的靶上酶解，15min内酶解即可完成。酶解后也无需将固定酶的树枝状聚合物修饰碳纳米管从靶上去除，即可直接用于质谱鉴定。同时，该方法比传统溶液酶解方法更适用于低浓度的样品酶解，结果表明浓度低至150 fmol/μL匹的牛血清白蛋白也可以通过该方法在靶上快速酶解。