辛基酚对雄性大鼠生精细胞精子发生过程的影响

摘要

目的:辛基酚具有类雌激素作用,对雄性动物有一定的生殖毒性,为了进一步评价辛基酚对雄性动物生精细胞精子发生过程的影响,在前期对青春期大鼠精子Igf2和Peg3印记基因DMR区CpG岛甲基化研究的基础上,从基因表达和蛋白水平检测了睾丸生精细胞中参与染色体重构的重要蛋白--组蛋白去乙酰基转移酶的变化,以探讨辛基酚对雄性动物生殖毒性的分子机制.rn 方法:取健康成年雄性大鼠60只，分4组，为辛基酚50mg/kg, 150mg/kg, 450mg/kg三个剂量组和生理盐水对照组，每组15只，连续灌胃染毒4周，最后一次给药后24小时处死动物，搜集分离精子，提取精子RNA，应用随机引物合成第一链cDNA，纯化定量，在相等模板的前提下PCR扩增，RT-PCR检测翠丸生精细胞组蛋白去乙酞基转移酶基因家族表达量的变化。根据基因家族表达量的变化结果，采用SDS-PAGE和Western检测HDAC4的变化。rn 结果:HDAC基因家族表达量的检测结果显示:与正常对照组比较，辛基酚150mg/kg,450mg/kg剂量组攀丸HDAC 1的表达量略有增高、HDAC4明显降低、50mg/kg剂量组均无明显变化;所有剂量组的HDAC2未能检出、HDAC3没有改变:针对辛基酚150mg/kg,450mg/kg剂量组翠丸HDAC4明显降低，SDS-PAGE和Western结果显示各剂量组的HDAC4均出现了90KD的剪接带，提示该蛋白在辛基酚的作用下被剪切。rn 结论:较高水平的辛基酚会干扰精子发生过程中的染色体重构，对雄性动物生殖细胞的形成有一定的毒性。