HPLC-ESI-IT-MSn法快速推定硫酸小诺霉素中有关物质的结构

摘要

目的：建立测定硫酸小诺霉素中有关物质的HPLC-ESI-IT-MSn方法，并对检出的有关物质结构进行鉴定。方法：用宽pH范围的Gemini NX C18(4.6 mm×150mm，5μm)色谱柱，以[水-氨水-冰醋酸(96：3.6：0.4)]-甲醇(80：20)为流动相，分离样品，并用ESI-IT-MSn检测，质谱条件：ESI离子源，离子源温度350℃，雾化室压力40psi，干燥气流速10 L/min，正离子检测方式;结构鉴定方法根据有无杂质对照品而异：有对照品的有关物质，采用比对有关物质与对照品的色谱保留时间、一级质谱、二级质谱的方法进行鉴定;对无对照品的有关物质，则采用被称为“诊断碎片离子推断策略”的结构推定方法，即通过解析庆大霉素C1a、小诺霉素、依替米星的二级质谱，对该类化合物的二级质谱裂解规律进行归纳，找出同类物质的特征碎片离子，用于推定检出的有关物质结构。结果：从硫酸小诺霉素原料中检出15个有关物质，对其中14个的结构进行了归属，结果显示，硫酸小诺霉素原料中有关物质分别为庆大霉素A、B、C组分及它们同分异构体或同系物、西索米星及其同系物、小诺霉素的部分降解产物及部分新化合物。结论：建立的HPLC-ESI-IT-MSn方法可用于硫酸小诺霉素中有关物质的结构快速推定，该方法为小诺霉素的工艺优化和质量标准提高提供了快速、可靠的分析手段。