人脂肪细胞增殖分化激动剂受体YⅠ基因的克隆及序列分析

摘要

目的:克隆人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法:从人的脂肪组织中提取总RNA并进行反转录,以此为模板用PCR扩增人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因的cDNA,然后与pET 28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序后与GenBank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因进行同源性比较和序列分析。结果:PCR扩增出一个1100bp左右的DNA片段,与载体重组后DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因,且所克隆的基因共编码384个氨基酸,分子量为44KD,与GenBank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因序列同源性达100％.结论:我们成功克隆的人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YI(YIR)基因与Genebank中人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因序列完全一致,通过对其相关生物学信息的明确分析,为进一步应用分子生物学技术深入研究人脂肪细胞增殖分化激动剂(hAAPD)受体YⅠ(YⅠR)基因与人体脂肪移植及自体脂肪主动重新分布等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础.