禾谷镰孢菌两个β-微管蛋白对多菌灵的敏感性差异

摘要

本研究分别敲除禾谷镰抱菌野生菌株2021的β1、β2-微管蛋白基因，测定各敲除突变体菌株对多菌灵的敏感性，结果表明，敲除其中任意一个β-微管蛋白基因的突变体菌株都对多菌灵敏感，但敏感性有差异;与野生菌株相比(EC50=0.56μg/ml) ,β1-微管蛋白基因敲除突变体菌株DB2-145对多菌灵的敏感性稍有降低(EC50=0.80μg/mll )，而β2-微管蛋白基因敲除突变体菌株DN2-212对多菌灵的敏感性显著升高(EC50=0.10μg/ml)。同时用绿色荧光蛋白GFP分别标记2021菌株的两个β-微管蛋白，获得原位标记β1-微管蛋白基因的菌株FB2-325和原位标记β2-微管蛋白基因的菌株FN2-338，通过荧光显微观察两菌株在不同药剂浓度下被标记的β-微管蛋白组装形成的微管的形态。菌株FB2-325在多菌灵0.5μg/ml处理条件下微管解聚而无成形的微管(胞质微管或纺锤体)可见。而在该条件下FN2-338菌株细胞内仍可见正常成形的微管;在药剂浓度为1.4μg/ml(野生菌株的MIG值)时，其细胞内绿色荧光散乱，再无成形的微管可见。以上结果表明禾谷镰抱菌的β1、β2-微管蛋白都是多菌灵等苯并咪唑杀菌剂的作用靶标，但β-微管蛋白与多菌灵的敏感性有差异，β2-微管蛋白对多菌灵更敏感一些。