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应用PCR法制备地高辛标记探针原位杂交检测绵羊卵巢褪黑素受体Mel1aα基因表达

摘要

采用RT-PCR技术从绵羊下丘脑组织中克隆到褪黑素(melatonin,Mel)受体Mel1aα基因,扩增序列全长653bp.以此为模板,运用随机引物法制备了地高辛(DIG)标记的核酸探针,检测探针的标记效率达到100ng/μL.利用此探针,采用原位杂交(ISH)技术,对卵巢组织Mel1aα基因进行检测.rn 杂交结果显示阳性,证明绵羊卵巢组织存在Mel1a α基因的mRNA表达.说明Mel可直接作用于卵巢组织,对生殖系统进行调控.

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