抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

摘要

为获得高特异性的抗隐孢子虫单克隆抗(monoclonal antibody，McAb)，以大肠杆菌中高效表达的隐孢子虫鼠基因型子孢子表面抗原CP15/60为免疫抗原，免疫BALB/c小鼠。rn 取脾细胞与SP2/0细胞融合，融合阳性细胞用间接ELISA方法进行筛选，有限稀释法3-4次克隆纯化，获得8株能稳定分泌抗隐孢子虫鼠基因型CP15/60蛋白的McAb杂交瘤细胞株，其接种产生的小鼠腹水和细胞培养液上清的最高效价分别可达1：276800和1：2800。对腹水效价较高的B4F7、D8H52株McAb进行染色体分析、亚型鉴定、亲和力测定、交叉反应性测定、Western blot检测以及分子量大小测定。结果显示其染色体数目为90-110，亚型均为IgG1，重链、轻链大小分别约为56 ku和27 ku，与球虫、血吸虫以及弓形虫无交叉反应，并具有良好的亚型特异性。表明获得了高特异性的抗隐孢子虫McAb。