重组人源化兔抗vEGF单克隆抗体的抗原结合活性测定

摘要

目的：采用直接ELISA法检测重组人源化抗vEGF单克隆抗体的抗原结合活性。方法：以固定量的vEGF-Fc做包被抗原，辣根过氧化酶标记的抗人IgG（H+L）为二抗，直接测定不同浓度参考品和供试品与抗原的结合活性，通过数据处理软件对结果绘图，根据供试品及参考品EC50值计算供试品的相对结合力。结果：重组人源化兔抗vEGF单抗供试品及参考品在该方法中均存在量效关系，且符合四参数方程。同一批次的供试品原液每次3支、分别经3次测定，相对结合活性分别为参比品的（90.43±18.74）%、（123.56±18.4）% 和（106.83±18.47）%，平均值（106.94±16.57）%。3次试验的变异系数分别为20.72%、14.89%和17.29%。同一批次的供试品成品每次3只、分别经3次测定，相对结合活性分别为（97.34±18.42）%、（123.30±11.08）%和（93.91±4.57）%，变异系数分别为18.93%、8.96%和4.87%。结论：直接ELISA法精密性良好，结果客观，影响因素少，可用于重组人源化兔抗vEGF单抗抗原结合活性的常规检测。