蒺藜皂苷对缺氧/复氧诱导大鼠皮层神经元凋亡的影响

摘要

目的：观察蒺藜皂苷对大鼠皮层神经元经缺氧/复氧后细胞凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。rn 方法：离体培养大鼠皮层神经元，先用95％N2与5％CO2混合气体造成细胞缺氧3小时，再给予95％O2与5％CO2混和气复氧12小时，建立缺氧/复氧损伤的皮层神经元凋亡模型.中药组于缺氧和复氧时均加入蒺藜皂苷进行干预。比色法测定皮质神经元乳酸脱氢酶(LDH)释放漏出率;Annexin V-FITC/PI双染，流式细胞仪定量分析细胞凋亡百分率;Fluo-3和JC-1荧光染色，激光扫描共聚焦显微镜分别观察细胞内钙和线粒体膜电位的变化，荧光酶标仪测定神经元胞浆内Caspase3/7的活性，并采用免疫细胞化学法观察细胞Bax蛋白表达情况.rn 结果：细胞经缺氧3h复氧12h后，凋亡率明显增加，细胞内钙增加，线粒体膜电位显著降低，胞浆内Caspase3/7活性增多，Bax蛋白大量表达(P<0.01).蒺藜皂苷能降低细胞内钙浓度，抑制缺氧-复氧损伤的皮层神经元线粒体膜电位的降低，减少Caspase3/7的活性，并可降低Bax蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡的发生(P<0.01)。rn 结论：缺氧/复氧可以诱导皮层神经元的凋亡。蒺藜皂苷可降低缺氧/复氧诱导细胞凋亡的发生，其机制与降低细胞内钙维持线粒体膜电位的稳定，抑制Caspase酶活性，降低Bax蛋白表达有关。