功能化碳纳米管/量子点纳米探针用于Caspase3激活和抑制的检测

摘要

细胞凋亡生理过程至少部分是由天冬氨酸特异性的半胱氨酸蛋白水解酶 （Caspase）介导完成的。Caspase 3 是凋亡过程中激活的最常见的一种半胱氨酸 蛋白酶，它在细胞凋亡中起执行凋亡的作用，是细胞凋亡的常见标志物。因此， 检测Caspase 3 活性以及研究潜在的抑制剂对Caspase 3的抑制已经成为细胞凋亡 研究中的重要课题，对肿瘤治疗方法的选择及疗效的监测有重要指导意义。本实 验是将量子点的信号放大技术与活性Caspase 3 对DEVD 肽段的特异性识别与酶 解相结合，研制了一种检测Caspase 3 活性与抑制作用的电化学传感器。将生物 素标记的、含有Caspase 3 特异性识别肽段DEVD的多肽（biotin-DEVD），其一 端含有半胱氨酸，利用末端的巯基将其组装到金电极的表面。然后将电极进入到 含有激活的Caspase 3 酶的凋亡细胞裂解液中,Caspase 3 酶可以特异性地识别 DEVD 肽段，并从N-末端将其切割。未被剪切的DEVD 肽段和含有亲和素（SA） 功能化的纳米探针CNTs-QDs-SA 相结合. 最终通过电化学方法测定 CNTs-QDs-SA，间接反映细胞裂解液中Caspase 3的活性(Scheme 1)。