田七注射液对大鼠肾纤维化的作用及TGF-β1/Smads信号转导机制的研究

摘要

目的：从TGF-β1/Smads信号转导通路研究田七注射液对阿霉素肾纤维化大鼠的作用机制。方法：(1)采用切除右肾、尾静脉注射阿霉素的方法建立阿霉素性肾纤维化大鼠模型。(2)将健康雄性SD大鼠48只随机分为正常组、假手术组、模型组和田七注射液组。4组大鼠均连续给药8周后处死，收集各组大鼠的尿液、血液和肾组织。检测各组大鼠24h尿蛋白定量和肾功能(BUN和Scr)，HE和Masson染色检测大鼠肾组织病理情况并半定量评分。RT-PCR、免疫组织化学法和Western Blot法检测各组大鼠肾组织Ⅳ型胶原(CL-Ⅳ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子-βl(TGF-β1)、转化生长因子β-Ⅰ型受体(TGF-βR-Ⅰ)、转化生长因子β-Ⅱ型受体(TGF-βR-Ⅱ)、磷酸化Smad2(p-Smad2)、磷酸化Smad7(p-Smad7)mRNA和/或蛋白的表达。结果：(I)切除右肾静注阿霉素后，大鼠尿蛋白排出增加(p<0.01)，肾功能BUN和Scr水平升高(p<0.0l)，肾组织出现肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化、炎症细胞浸润等病理改变，提示肾纤维化大鼠模型建立成功。(2)与假手术组比较，模型组大鼠尿蛋白排出增加，BUN和Scr水平升高(P<0.01)，肾小管CL-IV和a-SMA表达增多(P<0.01)，提示肾纤维化大鼠存在小管上皮-间质细胞转分化(EMT)过程。(3)与假手术组比较，阿霉素肾纤维化大鼠肾组织TGF-β1, TGF-βR-Ⅰ, TGF-βR-Ⅱ, p-Smad2, p-Smad7 mRNA和/或蛋白表达明著显上调(P