成体西藏小型猪胰岛体外分离与纯化的研究

摘要

目的：确定成体西藏小型猪胰岛体外分离、纯化的理想条件,为异种移植治疗糖尿病提供高质量的胰岛。方法：对比不同质量浓度(1g/1,2g/1,3g/1,4g/1)和同一质量浓度条件下不同时间点(0min,l5min,30min,45min,60min,75min,90min)胶原酶分离获得胰岛的数量和效果。使用Ficoll400密度梯度离心、淋巴分离液分离、离心、静置4种方法纯化分离胰岛悬液,比较最终收集到的胰岛数量和效果。结果：确定了不同质量浓度的胶原酶获取胰岛的最佳时间,胶原酶l g/l组为45rain,2g/1、3g/1和4g/1组为30min,各组在最佳时间点获得胰岛的数量最多的为1g/1组,各组在最佳时间点获得的胰岛形态完整,具有活性；4种纯化方法中,获得的胰岛数量由多到少依次为静置＞离心＞淋巴分离液离心＞ficoll400密度梯度离心,4种方法获得的胰岛均具有活性。结论：在组织块剪碎消化的情况下,胶原酶质量浓度1g/1、消化时间45min的分离条件可获得数量较多的胰岛,静置的纯化手段收集到的胰岛数量最多。