双醋瑞因对IL-1β诱导软骨细胞凋亡的影响和作用机制的研究

摘要

目的：探讨双醋瑞因对体外IL-1β诱导大鼠关节软骨细胞凋亡的影响以及可能作用机制.方法：体外培养SD大鼠关节软骨细胞,HE染色和Ⅱ型胶原免疫荧光染色鉴定软骨细胞,实验分成正常组、模型组(10ng/ml rhIL-1β)和双醋瑞因组(不同浓度双醋瑞因+10ng/ml rhIL-1 β),利用①流式细胞术观察软骨细胞凋亡率；②应用Western印迹和实时荧光定量PCR从蛋白质和基因两水平检测p38MAPK的表达.结果：①正常组的软骨细胞凋亡率为2-5％; IL-1β能够显著促进软骨细胞凋亡率(18-24％) (P＜0.01);10-4M和10-5M的双醋瑞因可降低IL-1 β诱导的软骨细胞凋亡率,凋亡率分别为11-13％ (P＜0.01)和15-17％ (P＜0.05),10-6M双醋瑞因对软骨细胞凋亡率无明显影响(P＞0.05).②与正常组比较,IL-1β能够显著诱导p38的磷酸化(P＜0.01),而双醋瑞因能够显著抑制IL-1 β诱导p38磷酸化(P＜0.01).③与正常组比较,模型组软骨细胞中p38mRNA的表达量升高21.92(3.78)倍,双醋瑞因组软骨细胞中p38mRNA的表达量下降为模型组的2-1.4 (0.38)倍.结论：双醋瑞因可在一定浓度范围内能够降低体外IL-1β诱导关节软骨细胞的早期凋亡率,其可能作用机制与双醋瑞因能够抑制软骨细胞中p38蛋白和基因的表达水平有关.