舒林酸对结肠癌细胞系HT-29细胞增殖及β-catenin蛋白表达的影响

摘要

目的：研究舒林酸对于结肠癌细胞的抑制作用。方法：取对数生长期的HT-29细胞按传代方式制成单细胞悬液，细胞密度为5×104/ml。将上述细胞悬液接种于96孔培养板，每孔加细胞悬液200μl，另取一孔加入不含细胞的培养液作为空白调零各孔中加入舒林酸配成的所需浓度(0mmol/L, 0.3mmol/L , 0.6mmol/L , 0.9mmol/L ,1.2mmol/L ),共5组，用自动酶标仪于492nm波长下测定各孔的吸光度值(absorbence value, A值)。Western-Blot方法检测舒林酸β-catenin蛋白表达的影响。接种HT-29细胞于12孔板,待细胞融合度达到50%加入不同浓度舒林酸(0mmol/l, 0.3mmol/l, 0.6mmol/l, 0.9 mmol/l, 1.2 mmol/l继续培养，于第3d收集细胞HT-29细胞1×107个;以β-actin为实验对照。结果：HT-29细胞舒林酸五组(0mmol/l, 0.3mmol/l, 0.6 mmol/l, 0.9 mmol/l, 1.2 mmol/l )杂交带五者的平均灰度值分别为(85.42±10.37),(82.96±8.65 ), ( 72.93±6.87 ), (32.53±5.32 )以及(8.43±1.34)。以0mmol/l作为参照组，0.6mmol/l组，0.9mmol/l组，1.2mmol/l组相比P＜0.05;0.3mmol/l组P＞0.05。结论：舒林酸在浓度大于0.6mmol/l时抑制结肠癌细胞生长繁殖:其机制之一为通过抑制细胞β-catenin蛋白表达。在相同的作用时间里，随着舒林酸浓度的增加，细胞数目的增加呈减少趋势，MTT法检侧时A值减少，说明舒林酸确能抑制结肠癌细胞的生长增殖，且随着舒林酸浓度的增加，其抑制率亦增加，呈较为典型的浓度依赖关系。