胸液标本结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点技术的建立及其应用

摘要

目的：建立胸液标本结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点检测技术，并评价其在结核性胸膜炎诊断及鉴别诊断中的应用价值。rn 方法：采用重组结核杆菌ESAT-6蛋白以及来源于ESAT-6/CFP-10蛋白的合成多肽组合(多肽库)为抗原，建立胸液标本结核分枝杆菌特异性IFN-γElispot检测技术(PFMC Elispot)。应用该技术对141例结核性胸膜炎患者。30例非结核病患者胸液进行结核菌特异性IFN—γ水平检测;平行比较患者外周血(PBMC)和胸液标本中IFN-γ应答情况。rn 结果：结核性胸膜炎患者PmC的IFN-γ分泌水平(266.99±149.44，294.95±155.93)显著高于PBMC的IFN-γ分泌水平(103.40±86.01，107.87±100.58)，P＜0.0001;而非结核性患者PFMC的IFN—γ分泌水平(17.10±22.65，11.50±19.29)与PBMC的IFN—γ分泌水平(13.90±26.07，9.60±26.11)差异无统计学意义(p=0.6178，P=0.7626)。PFMC标本Elispot检测的阳性率(95.04％)显著高于PBMCBlispot检测阳性率(82.27％)，P=0.0003.结核性胸膜炎病人组阳性率(95.04％)显著高于非结核性胸液组(10％)，P＜0.0001。rn 结论：检测胸液结核菌特异性IFN-γ Elispot技术可以应用于结核性胸膜炎的诊断和鉴别诊断，用PFMC Elispot 法检测结核性胸膜炎有很好的敏感性和特异性。