小鼠胶原诱导性关节炎模型的建立及其免疫学变化研究

摘要

目的:胶原诱导性关节炎模型(collagen induced arthritis,CIA)是研究类风湿性关节炎发病机制和治疗药物筛选的理想模型,也是目前国际上公认的关节炎模型。但是,目前鲜见Ⅱ型胶原诱导CIA模型的系统免疫学变化的报道。因此,本研究采用DBA/1小鼠诱导了CIA模型,并对其免疫学改变进行了系统研究。方法：将牛Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂混和并充分乳化,于DBA/1小鼠尾根部皮内注射进行初次免疫,20 d后同样方法进行再次免疫。应用千分尺测量CIA模型小鼠的左右两侧足掌厚度,并进行关节炎评分。酶联免疫吸附试验测定小鼠血清Ⅱ型胶原特异性抗体,Luminex技术和αLISA技术测定血清及培养上清中的细胞因子水平。结果：CIA小鼠于造模后23 d开始,陆续出现前肢、后肢的红肿、功能障碍,发病率高达100％,且随着时间的延长其关节肿胀程度呈进行性加重,关节炎评分增高。CIA小鼠脾脏指数较正常组明显升高,且Ⅱ型胶原刺激的特异性T细胞增殖明显增强。细胞因子检测结果表明,脾细胞培养上清中IFN-γ和1L-4含量及IFN-γ/IL-4比值明显升高,TNF-α和IL-1β水平亦显著升高。此外,CIA小鼠血清中存在高水平的Ⅱ型胶原特异性抗体。结论：Ⅱ型胶原诱导CIA模型发病率高,免疫学改变以Th1细胞因子升高为主,兼有细胞免疫功能及体液免疫功能损伤。