茶皂素的纯化及其苷元的制取

摘要

市售茶皂素纯度低,所含色素等杂质制约着茶皂素的应用范围,混合茶皂素不便活性精确定位和构效关系确认,更不利于获取单一茶皂苷元而进行的多样性药物分子设计合成.制取单体茶皂素及其苷元将为深度开发利用该天然产物提供可能性.采用溶剂沉淀和树脂吸附纯化市售茶皂素,酸水解、溶剂萃取和柱层析,获得其茶皂苷元,并通过色谱和波谱验证.结果显示,分离市售茶皂素粗品中主要单体的工艺为:80％乙醇溶解茶皂素,料液比为1:20(m/v),然后加入2倍于80％乙醇的丙酮,静置过夜,4℃冷冻离心;沉淀过AB-8型树脂,依次用水、稀碱、水和90％乙醇洗脱,醇洗脱液浓缩获得茶皂素,纯度从55％提高到96％.然后对其盐酸水解,工艺为:3mol/L HCL,料液比为1:15(m/v)的60％甲醇水溶液85℃加热回流5h;乙酸乙酯萃取液硅胶柱层析,收集石油醚-乙酸乙酯洗脱液,获得茶皂素苷元,波谱数据并与文献比对,确定其结构为:21-当归酰基22-乙酰茶皂苷元E.茶皂素对大肠杆菌、黑曲霉及其稻瘟病菌等具有较强的抑制作用。本文分离出一种未脱去C21当归酰基和C22乙酰基的茶皂苷元E，与彭玉萌等分离出强烈抑制稻瘟病菌木荷皂甙单体的皂苷元结构比较相似，区别在于C17、C22、C23位。可以以茶皂苷元为活性先导物进行半合成，C3位进行糖基化修饰或C22为进行当归酰基修饰，对茶皂甙抗稻瘟病菌构效关系进行研究。纯化茶皂素并水解成茶皂苷元，将推动茶籽饼粕的充分利用，推动齐墩果烷型皂苷新药的开发。