GTP酶-Irgm1对巨噬细胞亚型M1的影响

摘要

目的 就GTP酶-Irgm1对巨噬细胞亚型M1分化的影响及可能的机制进行探讨.方法 分别对小鼠腹腔原代巨噬细胞和小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞进行培养,通过流式细胞术并以CD11b及F4/80标记巨噬细胞.每种细胞分成siRNA干扰组与对照组,然后待细胞贴壁后24 h加入干扰素(IFN)-γ和脂多糖(LPS)体外诱导巨噬细胞向M1转化,再进行流式细胞术iNOS染色鉴定M1的百分比.最后利用Western blot和RT-PCR检测体外诱导M1细胞过程时IRF5、IRF8及iNOS的表达情况.结果 ①加入Irgm1 siRNA干扰组的M1百分比(3.4％)明显低于对照组(35.8％),差异有统计学意义(P＜0.05);②QPCR检测结果显示:加入Irgm1 siRNA的干扰组与对照组相比,IRF5和IRF8 mRNA表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blotting检测结果显示:加入Irgm1 siRNA干扰组与对照组相比,IRF5和IRF8蛋白表达明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 巨噬细胞内Irgrn1能够通过影响IFR5和IRF8的表达影响巨噬细胞型别的改变.