微核糖核酸-221对小鼠癫痫神经元细胞的作用及其机制研究

摘要

目的探讨微核糖核酸(miRNA)-221对小鼠癫痫神经元细胞氧化应激和凋亡影响的机制。方法建立癫痫神经元细胞株模型,随机分为正常对照组、miRNA阴性对照(miRNA-con)组和miRNA-221 mimic转染(miRNA-221)组,每组样本12例。采用实时荧光定量RT-PCR法检测细胞miRNA-221的表达;ELISA检测细胞中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)的含量;免疫印迹实验检测细胞中bcl-2、Bax、裂解的半胱天冬酶3(cleaved-Caspase3)、血红素氧化酶1(HO-1)、核转录相关因子2(Nrf2)蛋白质表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果在各组细胞进行转染干预后,miRNA-con组的miRNA-221表达水平(0.95±0.12),显著低于miRNA-221组(3.14±0.25,F=168.190,P0.05)。与miRNA-con组相比,miRNA-221组细胞中抗凋亡蛋白质bcl-2表达水平显著升高,促凋亡蛋白质Bax和cleaved-Caspase3表达水平显著降低,抗氧化应激蛋白质HO-1、Nrf2的表达水平显著升高(P值均<0.01)。结论过表达miRNA-221可减轻小鼠癫痫神经原细胞的氧化应激和凋亡反应诱导的细胞损伤。